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淺述細胞適應msc無血清培養基的方法News
淺述細胞適應msc無血清培養基的方法
更新時間:2021-08-17 點擊次數:1118次
  msc無血清培養基和試劑被廣泛的應用于培養哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數的產品含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質和清蛋白,纖維蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養中發揮各種不同的功能,如提供細胞貼壁所需的基質,抗生物反應器剪切力,作為脂質和其他生長分化因子的載體等。
  下面要為大家介紹的是細胞適應msc無血清培養基的方法:
  1、直接適應:細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基(SFM)中。
  一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應本產品。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,傳代培養細胞。當細胞密度在培養4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,細胞*適應了。每隔3~5天,當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了本產品的細胞培養物應該再次傳代培養。
  2、連續適應:分好幾步把細胞從添加血清的培養基轉換到本產品中,與直接適應相比較,連續適應趨向對于細胞更加溫和一些。
  (1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養物到75%有血清培養基:25%SFM混合培養基中,傳代培養。
  (2)當細胞密度>5×10細胞/ml時,以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,在有血清培養基:SFM為50∶50的混合培養基中傳代培養。
  (3)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,25%有血清培養基和75%SFM中傳代培養。
  (4)當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),在100%SFM培養基中傳代培養。
  (5)每隔3到5天,當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。
  希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本產品。