| 產地類別 | 進口 |
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NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
特性
■ 高效連接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修復
■ 構建高豐度克隆文庫
■ RNA 和 DNA 的連接
NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
概述
該酶(mei)催(cui)化(hua)(hua)雙(shuang)(shuang)鏈 DNA 或 RNA 上(shang)相鄰的(de) 5′-磷(lin)酸(suan)末(mo)端和 3′-羥基末(mo)端形成磷(lin)酸(suan)二(er)酯(zhi)鍵。該酶(mei)不僅能(neng)夠(gou)催(cui)化(hua)(hua)平齊(qi෴)末(mo)端或粘性末(mo)端之間的(de)連接，還(huan)可(ke)以修(xiu)復雙(shuang)(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜(za)交雙(shuang)(shuang)鏈中的(de)單鏈切(qie)刻。
來源
純化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
反應條件
1X T4 DNA 連接酶反應緩沖液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP]。推薦 DNA 5′ 末端濃度為 0.1-1.0 μM，16℃ 溫育。
熱失活：65℃ 10 分鐘。
單位定義（粘性末端活性單位）
1 單位指在 20 μl 1X T4 DNA 連接(jie)酶反🌄應緩沖液中(zhong)，16℃ 反應條件(jian)下，30 分鐘能使(shi) 50% 的(de)經 HindⅢ 消化的(de)λDNA 片段 [ 5′ 端濃度(du)為(wei) 0.12 μM（300 μg/ml）] 連接(jie)所需的(de)酶量。
濃度
400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。
注意事項
與 E. coli DNA 連(lian)接酶需(xu)要 NAD+ 作輔🍌因子不同，T4 DNA 連(lian)接酶的輔因子是 ATP。
稀釋(shi)后(hou)的 T4 DNA 連(lian)(lian)接酶應(ying)(ying)于 -20℃、50% 甘(gan)油(you)貯存(cun)(cun)緩沖(chong)液(ye)（稀釋(shi)緩沖(chong)液(ye) A，NEB #B8001）中(zhong)保存(cun)(cun)。如(ru)稀釋(s🍃hi)后(hou)馬上使用，也可用 1X T4 DN𒈔A 連(lian)(lian)接酶反應(ying)(ying)緩沖(chong)液(ye)稀釋(shi)。
只要在反應體♍系中補加 1 mM ATP，連接反應就可♊以(yi)在 NEB 提供的四種限制性(xing)內切酶緩(huan)沖液或在
T4 DNA 多聚核苷(gan)酸激酶反應緩沖(chong)液(ye)中進行。
T4 DNA 連接酶
貨 號
規 格
價 格
北京庫存
上海庫存
#M0202L
100,000 units
有
有
#M0202M
(高濃度5X) 100,000 units
有
有
#M0202S
20,000 units
有
有
#M0202T
(高濃度5X) 20,000 units
有
有
#M0202V
10,000 units
有
有
